一、樣本相關(guān)問題
1、樣本污染
樣本采集過程中接觸外來 DNA(如他人血液、唾液、皮膚細(xì)胞)可能導(dǎo)致污染。例如,采集口腔拭子時(shí)未清潔手部,或使用非無菌工具;處理毛發(fā)樣本時(shí)接觸他人毛囊細(xì)胞;血液樣本與其他樣本交叉污染等。污染會(huì)引入額外基因信息,干擾分型結(jié)果。
2、樣本降解或質(zhì)量不足
樣本保存不當(dāng)易導(dǎo)致 DNA 降解,如血液樣本未冷藏、暴露于高溫潮濕環(huán)境;毛發(fā)樣本無毛囊(僅毛干不含核 DNA);陳舊煙頭、口香糖等特殊樣本因 DNA 含量低或降解嚴(yán)重,可能無法有效提取完整基因片段,導(dǎo)致分型失敗或數(shù)據(jù)不全。
3、樣本錯(cuò)誤標(biāo)記
個(gè)人隱私鑒定中自行采集樣本時(shí),若標(biāo)記混亂(如混淆父母與孩子的樣本),或郵寄過程中樣本包裝破損、標(biāo)簽脫落,會(huì)直接導(dǎo)致結(jié)果與實(shí)際關(guān)系不符。
二、實(shí)驗(yàn)操作失誤
1、實(shí)驗(yàn)流程不規(guī)范
實(shí)驗(yàn)室若未嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作,可能引入誤差。例如,DNA 提取時(shí)試劑配比錯(cuò)誤導(dǎo)致提取效率低;PCR 擴(kuò)增階段引物設(shè)計(jì)不合理、退火溫度偏差,或擴(kuò)增循環(huán)數(shù)異常,可能引發(fā)非特異性擴(kuò)增,產(chǎn)生假陽性條帶。
2、設(shè)備故障或校準(zhǔn)問題
毛細(xì)管電泳儀等核心設(shè)備若未定期校準(zhǔn),可能導(dǎo)致 DNA 片段長(zhǎng)度判讀錯(cuò)誤;檢測(cè)軟件版本過時(shí)或參數(shù)設(shè)置不當(dāng),會(huì)影響等位基因分型的準(zhǔn)確性,尤其對(duì)低峰信號(hào)的識(shí)別易出現(xiàn)偏差。
3、人為操作疏漏
實(shí)驗(yàn)人員在樣本編號(hào)、移液操作中出現(xiàn)疏忽(如樣本交叉混淆、加樣量錯(cuò)誤),或數(shù)據(jù)分析時(shí)誤讀電泳圖譜,可能直接導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤。
三、技術(shù)方法局限與特殊生物學(xué)因素
1、基因突變影響
親子代之間的基因座可能發(fā)生自然突變(概率約 0.1%~0.3%),若檢測(cè)的 STR 位點(diǎn)中出現(xiàn) 1~2 個(gè)不匹配,需通過增加檢測(cè)位點(diǎn)或計(jì)算親權(quán)指數(shù)排除突變干擾。若未充分考慮突變,可能誤判為非親子關(guān)系。
2、近親血緣干擾
當(dāng)疑似父親與真實(shí)父親為近親(如兄弟、父子)時(shí),二者基因相似度較高,部分 STR 位點(diǎn)可能出現(xiàn)相同分型,若檢測(cè)位點(diǎn)數(shù)量不足,可能導(dǎo)致親權(quán)指數(shù)計(jì)算偏差。
3、特殊遺傳情況
極少數(shù)情況下,嵌合體(個(gè)體體內(nèi)存在兩種不同 DNA 型別)、異卵雙生融合等特殊遺傳現(xiàn)象,可能導(dǎo)致樣本中 DNA 分型異常,影響鑒定結(jié)果判斷。
四、機(jī)構(gòu)資質(zhì)與流程缺陷
選擇無資質(zhì)的非正規(guī)機(jī)構(gòu),可能存在實(shí)驗(yàn)環(huán)境簡(jiǎn)陋、技術(shù)人員專業(yè)不足、缺乏質(zhì)量控制體系等問題。例如,使用過時(shí)的檢測(cè)技術(shù)(如僅檢測(cè) 10 個(gè)以下 STR 位點(diǎn)),或未進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,會(huì)顯著增加結(jié)果錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn)。
如何規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)?
為確保結(jié)果準(zhǔn)確,需選擇具備司法資質(zhì)的正規(guī)檢測(cè)機(jī)構(gòu),嚴(yán)格遵循樣本采集規(guī)范(如司法親子鑒定需現(xiàn)場(chǎng)采樣并拍照留證),避免自行處理特殊樣本,同時(shí)要求機(jī)構(gòu)提供完整的實(shí)驗(yàn)流程報(bào)告和基因分型圖譜,以便追溯核查。