冰凍切片油紅O染色觀察脂滴呈紅色-上海鄭核

一、實(shí)驗(yàn)器材及試劑

1、實(shí)驗(yàn)器材

名稱 廠家 型號

冰凍切片機(jī) Thermo CRYOSTAR NX50

切片刀 上海徠卡儀器有限公司 LEICA 819

載玻片 Servicebio

2、主要實(shí)驗(yàn)試劑

試劑名稱 廠家 貨號

固定液 Servicebio G1101

油紅染液 Servicebio G1016

蘇木素染液 servicebio G1004

分化液 servicebio G1005-3

返藍(lán)液 servicebio G1005-4

甘油明膠封片劑 Servicebio G1402

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1、新鮮冰凍切片固定：將冰凍切片復(fù)溫干燥，固定液中固定15min，自來水洗，晾干。

2、油紅染色：切片入油紅染液浸染8-10min(加蓋避光)，蒸餾水洗；

3、背景分化：75%酒精稍分化，蒸餾水洗。

4、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗，分化液分化，自來水洗，返藍(lán)液返藍(lán)，流水沖洗。

5、封片：甘油明膠封片劑封片。

6、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

三、結(jié)果判讀：

脂滴呈橘紅色至鮮紅色，細(xì)胞核藍(lán)色。

四、注意事項(xiàng)：

1、如果是新鮮組織冰凍切片，需要先固定再染色；如果組織是固定以后冰凍切片，可以將

切片晾干以后，直接染色。

2、整個操作過程中注意動作輕緩，不宜動作太大，以免脂肪丟失或者移位。

3、染色結(jié)果不能長期保存，封片后應(yīng)盡快觀察及拍照。

4、甘油明膠常溫下為凝固狀，一般60℃烤箱中保存。封片后如有氣泡不能按壓玻片也不宜

強(qiáng)行扯下蓋玻片，玻片可入溫水中，讓蓋玻片自行脫落，然后重新封片

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